COVID-19: La nueva enfermedad X / COVID-19: the new disease X

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Participación de Investigadores Civiles y Veterinarios Militares Españoles en el Experimento Espacial BIOMEX (Biology and Mars Experiment) con la Agencia Espacial Europea (ESA) / Participation of Spanish Civil Researches and Spanish Military Veterinarians in the BIOMEX Space Experiment (Biology and Mars Experiment) with the European Space Agency (ESA)

The BIOMEX experiment (Biology and Mars Experiment, ILSRA 2009-0834) was part of the SUBLIMAS project (acronym for "Survival of bacteria and lichens in analogues of Mars and space"), led by INTA and funded by the Ministry of Science, Innovation and Universities (ESP2015-69810-R). The main objective of the SUBLIMAS project is the study of the survival and degradation of extremophilic organisms (lichens among others) in space and in simulated conditions of Mars in the long term. The results of this experiment showed that, after a long period of exposure in the EXPOSE-R2 installation on the International Space Station, the Circinaria gyrosa lichen was able to recover photosynthetic activity. It is of great interest to do studies in living organisms in extreme situations, as well as the need for collaborations between different institutions to carry them out. Highlight the participation of veterinarians of the Military Health Corps among other researchers, as well as the learning generated after participating in coordinated projects. These fndings extend knowledge about the resistance of life to space conditions and contribute to the understanding of the adaptation potential of extremophilic organisms to the environmental conditions of the Martian Surface

El experimento BIOMEX (Biology and Mars Experiment), ILSRA 2009-0834 formó parte del proyecto SUBLIMAS (acrónimo de "Supervivencia de bacterias y líquenes en análogos de Marte y en el espacio"), liderado por el Departamento de Observación de la Tierra del INTA-Campus de Torrejón y fnanciado por el Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (Modalidad 1, Proyectos I+D+i del Programa Estatal de Investigación, Desarrollo e Innovación, orientado a los Retos de la Sociedad, referencia ESP2015-69810-R). En este proyecto participa personal del Área de Defensa Biológica (INTA-Campus La Marañosa, España) y entre el mismo dos ofciales veterinarios del Cuerpo Militar de Sanidad con la especialidad complemen-taria de Microbiología, Higiene y Sanidad ambiental. También participa el Instituto de Geociencias (IGEO-CSIC, España), el Institute of Planetary Research (DLR, Alemania), el Instituto de Recursos Naturales y Agrobiología de Sevilla (IRNAS-CSIC, España) y la Umea University (Suecia)

Optimización y Validación de una PCR en Tiempo Real para la Rápida Identificación de Bacillus thuringiensis, Simulador de Bacillus anthracis / Optimization and validation of a real-time PCR for rapid identification of Bacillus thuringiensis, surrogate of Bacillus anthracis

INTRODUCCIÓN: Bacillus anthracis es uno de los agentes de guerra biológica más empleados en el mundo. Sin embargo, en los laboratorios de defensa biológica es conveniente utilizar en muchas ocasiones otras bacterias parecidas a Bacillus anthracis pero menos peligrosas o apatógenas. Uno de los principales simuladores de Bacillus anthracis es Bacillus thuringiensis, debido a su elevada homología con B. anthracis y a su nula patogenicidad para el ser humano. OBJETIVOS: El objetivo del presente estudio es desarrollar y validar una PCR en tiempo real para la rápida identificación del ADN de Bacillus thuringiensis, agente empleado muy a menudo en los simulacros para entrenamiento de las Unidades Operativas de toma de muestras NBQ de las FAS. Material y MÉTODOS: La identificación del simulador Bacillus thuringiensis se ha realizado mediante la amplificación y detección con una sonda de hidrólisis de un fragmento de 69 pares de bases del gen cry1A, el cual es específico de esta bacteria. Tras optimizar las condiciones de amplificación probando tres temperaturas diferentes de hibridación/extensión, se procedió a realizar la validación del método desarrollado. RESULTADOS: La nueva PCR en tiempo real desarrollada presentó una eficiencia del 93%, así como una elevada linealidad (coeficiente de regresión R2 0,9993). El límite de detección al 95% de probabilidad fue de 13 equivalentes de genoma completo por reacción. Tanto la inclusividad como la exclusividad del método fueron del 100%. CONCLUSIONES: El método molecular desarrollado por el Laboratorio de Biología Molecular del INTA permite una rápida identificación del ADN de Bacillus thuringiensis, simulador de Bacillus anthracis, con unas elevadas sensibilidad y especificidad analíticas

INTRODUCTION: Bacillus anthracis is the most employed biological warfare agent in the world. However, in biological defense laboratories, many times it is convenient to use other bacteria similar to Bacillus anthracis but less dangerous or non-pathogenic. One of the main surrogates of Bacillus anthracis is Bacillus thuringiensis, due to its high homology with B. anthracis and its null pathogenicity for humans. OBJECTIVE: The objective of the present study is to develope and validate a real-time PCR for the rapid identification of Bacillus thuringiensis DNA, biological agent very often employed in the training of the Operative Units of CBRN sampling of the Armed Forces. METHODS: The identification of Bacillus thuringiensis has been performed by the amplification and detection with a hydrolysis probe of a 69 base pairs fragment of the cry1A gene, which is specific for this bacterium. After optimizing the amplification conditions by testing three different hybridization / extension temperatures, the validation of the new developed method was carried out. RESULTS: The new developed real-time PCR showed an efficiency of 93%, as well as a high linearity (regression coefficient R20.9993). The limit of detection at 95% probability was 13 genome equivalents per reaction. Both the inclusiveness and the exclusivity of the method were 100%. CONCLUSIONS: The molecular method developed at the Molecular Biology Laboratory of INTA allows the rapid identification of Bacillus thuringiensis DNA, surrogate of Bacillus anthracis, with a high analytical sensitivity and specificity

PCR cuantitativa en tiempo real para la amplificación de ADN de Burkholderia mallei: comparación con el método molecular recomendado por la OIE / Quantitative PCR in real time to Burhholderia mallei ADN amplification: A comparison with the molecular method recommended by OIE

Objetivo principal: Comparar dos PCRs en tiempo real cuantitativas para la identificacion de Burkholderia mallei, en terminos de sensibilidad y especificidad analiticas. Metodología: Amplificacion parcial de genes de B. mallei:- orf11 y orf13 del sistema de secreción de tipo III TTS1 del genero Burkholderia mediante qPCR con sondas de hibridacion. - fliP que codifica para la flagelina P de B. mallei mediante qPCR con sonda TaqMan. Calculo de parametros de validez. Resultados: El ensayo desarrollado en el laboratorio obtuvo un limite de deteccion del orden del obtenido con el metodo recomendado por la OIE (70,4 fg/reaccion) y permitio la amplificación especifica de ADN de B. mallei. Conclusión: El metodo desarrollado por el laboratorio de Biologia Molecular del INTA permite una rapida amplificacion de ADN de B.mallei con unas elevadas sensibilidad y especificidad analiticas. Ademas, posibilita la diferenciacion entre B. mallei y B. pseudomallei (AU)

Objective: Comparison of two quantitative real-time PCRs for identification of Burkholderia mallei, on analytical sensitivity and specificity terms. Methods: Partial amplification of Burkholderia mallei gene: - orf11 and orf13 targeting the type III secretion TTS1 system cluster from Burkholderia genus by qPCR using hybridisation probes. - fliP targeting flageling P from B. mallei by qPCR by using TaqMan probe. Validity parameters determination. Results: The duplex test developed by the Molecular Biology Laboratory at INTA obtained a limit of detection similar to that reached by the molecular method recommended by the OIE and permitted the specific amplification of B. mallei DNA. Conclusions: The duplex test developed by the Molecular Biology Laboratory at INTA provides a rapid amplification of B. mallei DNA. It also shows high analytical sensitivity and specificity. Furthermore, this test permits the differentiation between B. mallei and B. pseudomallei (AU)

Clasificación en subtipos moleculares de tumores de mama de pequeños animales mediante métodos inmunohistoquímicos / Classification in molecular subtypes of breast tumors of small animals through immunohistochemical methods

Antecedentes y Objetivos: Aplicar un panel de anticuerpos (anti -receptor de progesterona, -receptor de estrógenos, -receptor del factor de crecimiento epidérmico humano 2 y -citoqueratina 14) utilizando métodos inmunohistoquímicos en tumores mamarios de pequeños animales para analizar su clasificación en subtipos moleculares y su asociación con la invasión, el grado y el tipo histológico de las neoplasias. Material y Métodos: Muestras de tumores mamarios malignos, 10 de la especie canina y 3 de la felina. Control positivo interno: glándula mamaria no tumoral adyacente a las neoplasias. Resultados: El 23% (3/13) de los tumores fueron del subtipo luminal B, el 23% (3/13) fueron HER2 positivos, el 46% (6/13) fueron basales y el 7,6% (1/13) no se pudieron clasificar porque no expresaron ninguno de los marcadores tumorales analizados. Ningún caso fue del subtipo luminal A. Los 6 tumores basales fueron de grado II o III y presentaban o infiltración de solo el estroma o también invasión vascula Dos tercios de los tumores HER2 positivos presentaban infiltración del estroma y 1/2 tumores resultó ser de grado II. Los tumores luminal B, 2/3 fueron de grado II o III. Todos los controles internos fueron positivos. No se encontraron diferencias significativas en la distribución de los subtipos moleculares entre los diferentes grupos de las variables invasión (p-valor=0,26), ni grado de malignidad (p-valor=0,42). Sí hubo diferencias en el límite de la significación estadística en la distribución de los subtipos moleculares entre los diferentes grupos de la variable tipo histológico (p=0,08). Conclusiones: La aplicación del panel de anticuerpos ha permitido descubrir 4 (luminal B, HER2, basal y sin clasificar) de los 5 subtipos moleculares posibles (AU)

Antecedents and objectives: to apply an antibodies panel (anti-progesterone receptor -estrogen receptor, -human epi-dermal growth factor receptor 2 and cytokeratin 14) using immunohistochemical methods in mammary tumors of small animals to classify them in molecular subtypes and their association with the invasion, grade and histological type of the malignancies. Material and Methods: samples of malignant mammary tumors, 10 from canine species and 3 from feline ones. Internal positive control: non-tumoral mammary gland adjacent to the malignancy. Results: 23% (3/13) of the tumors were of the luminal B subtype, 23% (3/13) were HER2 positive, 46% (6/13) were basal types and 7,6% (1/13) were unclassifiable because they did not express any of the tested tumor markers. None of the cases belonged to the luminal A subtype. The 6 basal tumors were grade II or III and presented only stromal infiltration or vascular invasion as well. Two thirds of the HER2 positive tumors presented stromal infiltration and hal he tumors were grade II. Two thirds of luminal B tumors were grade II or III. All internal controls were positive. There were no signifi-cant differences in the distribution of the molecular subtypes among the different groups of the invasion (p-value=0.26) and malig-nancy grade variables (p-value=0.42). There were differences of borderline statistical significance in the distribution of the molecular subtypes among the different groups of the histological type variable (p-value=0.08). Conclusions: the application of the antibodies panel has allowed to find 4 (luminal B, HER2, basal and unclassified) out of 5 possible molecular subtypes (AU)

Tumor de células redondas en un perro de 7 meses / No disponible

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Dermatosis localizada en un perro de 2 años / No disponible

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Dermatosis localizada en región nasal de un perro pastor alemán / No disponible

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Tumor subcutáneo de células redondas en un perro / Subcutaneous tumor of round cells in a dog

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